單通道移液器移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。
一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第1停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第1停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。后松開按鈕。
二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第1停點排出設置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第1停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。
單通道移液器移液的八個步驟:
1、裝吸頭:套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。
2、量程設定:操作之前請先選擇正確的移液器量程范圍。量程調(diào)節(jié)時如果是由小量程調(diào)節(jié)至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達超過所需量程的三分之一圈處再回調(diào)至所需量程。當由大量程調(diào)節(jié)至小量程時,直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3、潤洗:粘稠液體可以通過吸頭預潤濕的方式來達到精確移液,先吸入樣液,打出,吸頭內(nèi)壁會吸附一層液體,使表面吸附達到飽和,然后再吸入樣液,最后打出液體的體積會很精確。用同一樣品重復吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。對常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準確性;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準確性,請使用者特別注意。
4、吸頭浸入角度:吸液時盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角度不能超過20°。
5、吸頭浸入時間:吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
6、吸液速度:勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部,污染活塞等部件。
7、排液及吹液:先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進行吹液。排液四種方式:在液面以上、在液體表面、液面下、沿內(nèi)壁。
8、手溫:單通道移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。